Dorsey originalmente estudió informática en la Universidad de Ciencia y Tecnología de Missouri antes de abandonarla en 1999. Después de trabajar como programador y desarrollador para varias empresas, Dorsey cofundó Twitter con Biz Stone, Evan Williams y Noah Glass en 2006. como director ejecutivo de la empresa hasta 2008 y regresó al cargo en 2015.
En 2009, Dorsey cofundó Square, una empresa de pagos móviles con sede en San Francisco. Dorsey se desempeña como director ejecutivo de Twitter y Square.
En 2020, Dorsey anunció su dimisión como director ejecutivo de Twitter, a partir del 29 de noviembre de 2021. Permanecerá en la junta directiva. Parag Agrawal, ex director de tecnología de la empresa, asumirá el cargo de director ejecutivo.